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微生物實驗開始前,新購進玻璃器皿的清潔與滅菌處理

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食品微生物檢測實驗室使用的玻璃器皿種類很多,應按不同的使用要求選擇不同的玻璃品種,大多數選用中興硬質玻璃(硼酸鹽玻璃),硬質玻璃能耐高熱、高壓、抗溫度急變性好、耐腐蝕性好,同時其中游離堿含量低,不會影響培養基的酸堿度。現將玻璃器皿的清潔與滅菌介紹如下。

 

一、玻璃器皿的清潔

 

1.新購進玻璃器皿的處理

新購進玻璃器皿上一般附有游離堿性物質,不能直接使用,應在2%鹽酸溶液中浸泡幾小時,把表面的堿性中和后,再用肥皂水或洗衣粉洗刷玻璃器皿的內外,然后用清水反復沖洗,來出去殘留的酸質,最后用蒸餾水沖洗干凈。
2.對反復使用的玻璃器皿的處理常用的玻璃器皿,如平皿、試管、燒杯、燒瓶等,要先高壓滅菌(121℃、30min),趁熱倒掉容器中的廢棄物,以溫水沖凈,再加5%肥皂水煮沸5min,然后趁熱洗刷干凈,最后用蒸餾水沖洗干凈。

 

3.載玻片與蓋玻片
新買的載玻片與蓋玻片,以新購進的玻璃器皿處理方法清洗;用過載玻片的可以放入2%來蘇爾或5%石碳酸溶液中浸泡好后,取出后水洗,再用5%肥皂水煮沸20min,然后用毛刷蘸肥皂刷洗,最后用清水反復沖洗干凈。載玻片浸泡在95%的酒精1min,取出用軟布擦干,再放入盛蒸餾水的燒杯中浸泡5min以除去溶劑,烘干備用。

 

4.清潔劑的種類及使用
玻璃儀器常用的清潔劑是洗衣粉、去污粉、肥皂、洗液、有機溶劑等。對于可以用刷子直接刷洗的玻璃器皿,可用肥皂、洗衣粉、去污粉的水溶液直接刷洗。對于蒸餾瓶、容量瓶、移液管、滴定管等不容易用刷子刷的儀器,用洗液洗。洗液還可以用來洗刷子刷不下的頑固污漬和久置不用的器皿,洗刷頑固污漬時,要有足夠的浸泡時間。使洗液與儀器表面的污物充分發生化學作用;有機溶劑可以用來去除器皿表面的油脂,如甲苯、二甲苯、汽油等;有的也可利用能與水混合又易揮發的特點去除儀器上的水,如酒精、乙醚等。

 

5.玻璃儀器的洗滌方法與要求

1)人工清洗:帶干凈的手套或洗凈手,用清水沖洗器皿;選擇合適的潔凈劑洗刷或浸泡;先用自來水沖洗,再用蒸餾水順壁沖洗充分震蕩,直至玻璃器皿上掛不住水珠,用指示劑檢查為中性。

 

2)超聲波清洗:加入清洗劑,利用清洗劑的化學作用和超聲波的物理作用,達到對玻璃器皿的成分清洗的目的,超聲波在30~40℃時凈化效果最好,在實際工作中一般采用40~60℃的工作溫度。用清洗劑洗刷完后,再用清水洗,直至達到玻璃器皿清洗要求。

 

6.玻璃器皿洗刷應注意的問題
含油脂(石蠟油、凡士林)的玻璃器皿要單獨清洗,洗刷前盡量先去油,單獨高壓滅菌后,趁熱倒掉污物,然后將玻璃器皿倒置于鋪有粗吸水紙的鐵絲筐內,放于100℃烘箱內0.5h,取出后再放入5%碳酸氫鈉水中煮兩次,然后用肥皂水刷洗干凈,最后用蒸餾水沖洗干凈。

 

用來做熒光分析的玻璃器皿儀器應避免用洗衣粉洗,因洗衣粉中的熒光增白劑會影響實驗結果。

 

二、玻璃器皿的包扎

 

玻璃器皿在滅菌前,應用紙或金屬桶等包裹,防止消毒滅菌后,被外界的雜菌所污染。

 

1.燒杯、三角瓶、試管等

可用做好的合適的棉塞塞好,外面再用紙和細繩包扎一下,以防棉塞掉下。燒杯可用紙和繩包扎即可。燒杯、三角瓶和試管包扎見下圖。

 

2.培養皿
可用牛皮紙或雙層報紙單個或數個包成一包,也可直接放入特制的培養皿滅菌金屬桶內,加蓋滅菌。用牛皮紙或報紙包扎的過程如下圖。

 

1)將12個玻璃培養皿按圖2~4個堆放在牛皮紙或雙層報紙(4開,39cm×54cm)上,兩頭擰緊。

 

2)用雙手拇指和食指將紙邊裹在平皿堆表面,同時用雙手的無名指和小指擠緊平板。將平皿堆向前滾,順勢將紙緊緊包裹在平皿堆的外面,整個推進的過程中雙手無名指和小指都要擠緊平板。包裹的松緊程度直接決定最終的包扎質量。

 

3)當紙全部包裹在平板堆表面后,將平板堆數值放在桌面上。將平板堆兩頭的紙依次疊好別緊。

 

3.移液管

在包裝前先用長針等在上口處塞少量的棉花(勿用脫脂棉),既可防止吸取液體時,液體被吸出造成污染,又可對吹入吸管的空氣起一個過濾作用。塞入的棉花的量要適宜,距管口約0.5cm左右,棉花的長度約1cm~1.5cm。棉花要塞得松緊適度,吹時既能通氣又不能使棉花下滑。移液管可用紙分別卷包,也可用多支包成一束或裝入金屬桶進行滅菌。

 

單支移液管的包裝可先將牛皮紙(或報紙)剪成約5cm的長紙條,再將移液管的尖端放在紙的一段,約成45°角,折疊包好尖端,一手拿管身,一手壓緊管和紙,在桌上向前搓滾,使紙成螺旋狀把管包起來,上端剩余的紙條折疊后打結即可。見下圖。

  

 

三、玻璃器皿的滅菌

 

1.干熱滅菌

玻璃器皿干燥包裝后可在電熱干燥箱內進行干熱滅菌,加熱160~180℃,維持2h。包裝放置在干燥箱內,不要和箱壁接觸,打開電源后,先把箱頂部的通氣孔打開一點,讓濕空氣逸出,當箱內溫度達到100℃后,關閉通氣孔。調節溫度控制旋鈕到設定的溫度,升溫至所設定的溫度時,維持1h~2h進行滅菌。滅菌完成后,關掉電源,冷卻到60℃時,再打開箱門。溫度控制旋鈕歸位,并打開頂部通氣孔。滅菌后的器皿,要1周內用完。

 

2.高壓蒸汽滅菌
在高壓蒸汽滅菌器內進行,是一種最普遍的、有效的滅菌方法。

信息來源:https://mp.weixin.qq.com/s/055i1n38ICR6ETZitEYYfQ

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